一、梅花鹿人工授精配套新技术研究(论文文献综述)
张鑫[1](2020)在《梅花鹿定时输精技术的改进与生产应用》文中提出宁夏存栏梅花鹿6000余头,主要分布在六盘山地区、中卫市和银川北部地区。梅花鹿属于季节性发情动物,在国内梅花鹿人工授精工作要求必须在九月初开始十月初结束,时间紧迫,工作量大。梅花鹿生性胆小野性大,开展试情工作难度太大,导致梅花鹿发情揭发率低,受胎率低。因此在生产中研究和应用同期排卵定时输精技术的意义重大,将会使梅花鹿的人工改良工作难度大幅降低。梅花鹿人工输精法有直肠把握输精法、开膣器输精法、腹腔镜子宫角输精法、同期发情人工授精技术等。开膣器输精法(用卡苏输精枪)不能保证输精枪完全通过子宫颈。使用简易输精枪,子宫颈口通过率高,但是卫生和无菌操作很难保证,而且埋栓以后的阴道有一定的感染率,输精枪通过阴道有污染子宫的风险。腹腔镜子宫角输精法摒弃了常规的输精通道,以微创无菌的手术通路直接将精液注入子宫角,规避了诸多不利因素的制约,降低了感染的风险,可以节约精液用量,并且可能获得更高的受胎率,值得在梅花鹿繁育工作中研究和推广。在绵羊和梅花鹿的同期发情工作中采取阴道埋置孕酮栓引发阴道感染和栓体丢失的现象比较常见,严重影响输精效果和情期受胎率。试验经过多次对梅花鹿定时输精技术的改进,并比较不同输精方法的受胎率和实用性,得出以下结论:1.梅花鹿同期排卵定时输精可以取得较高的情期受胎率。因此同期排卵定时输精程序适合推广应用,并在今后的生产实践中应继续总结和提高;2.梅花鹿阴道开膣器简易输精法比腹腔镜输精法更适合梅花鹿输精。梅花鹿子宫颈开口狭窄,卡苏输精枪不易通过,而简易输精枪因枪头较细容易通过子宫颈口。经过简易输精枪操作,证明梅花鹿子宫颈结构并不复杂,枪头进入子宫颈口后均能顺利通过整个子宫颈;3.腹腔镜输精法操作复杂,需要特定的手术环境和较昂贵的手术设备,要求术者技能高超熟练,需要配合人员数量多,不适于梅花鹿生产中推广,但是有较大的商业运用潜力,一旦技术成熟,非常适合规模化生产应用。本试验结果与预期结果相差甚远,该技术在生产中应用中还有待继续研究。4.埋栓时严格执行无菌操作技术流程并使用抗生素可以显着降低感染率;5.自制阴道栓置入器可以将栓体埋入阴道深部防止丢栓,同时CIDR栓尾结构完整,撤栓操作省时省力,有效控制了感染,工作效率也得到了显着提高。
杨鹏[2](2018)在《梅花鹿人工授精技术》文中进行了进一步梳理梅花鹿人工授精配套新技术的研发始于1998年5月,2002年7月通过省级科技成果鉴定,历时5年,已通过省级科研成果鉴定,达到同类研究的国际先进水平,鉴定委员会认为此项技术已趋完善可以在全国推广应用,梅花鹿的人工授精对鹿的品种改良和大幅度提高鹿茸产量具有重大意义。梅花鹿人工授精技术可提高西丰梅花鹿母鹿妊娠率、提高优良种公鹿的利用率、解决个体养鹿配种难的问题,提高后代鹿茸产量,提升经济效益。
木沙·托合提[3](2017)在《塔里木兔精液采集及其保存方法的研究》文中研究指明塔里木兔(Lepus yarcandensis)是我国特有物种,为国家二级保护动物。近年,南疆部分区域对林业及农业的危害逐年加重。然而,近年国内野兔需求市场日趋火爆,偷捕盗猎、非法倒卖时有发生并呈上升趋势。为满足市场对塔里木兔的需求,减轻野生种群的压力,通过驯养繁殖,实现保护与利用紧密结合。但塔里木兔野性强、个体小、自然繁殖率低,且其繁殖机理不明、人工繁殖技术研究尚属空白。塔里木兔精液采集及其保存方法的研究,为“精子库的建立”及人工授精技术体系的建立提供试验数据参考。本研究以塔里木兔为试验对象,采用现代动物繁殖技术手段,研究塔里木兔精液采集及其保存方法,本研究包括以下6部分内容:1.筛选适合塔里木兔麻醉保定药物种类及剂量。采用3种麻醉保定药物(速眠新Ⅱ、戊巴比妥钠、乌来糖),按不同剂量进行药物保定,检测麻醉所需时间、麻醉持续时间、麻醉状态、不良反应等指标,探讨不同麻醉保定药物及其剂量对塔里木兔麻醉效果的影响。结果表明,3种麻醉药物均能有效诱导塔里木兔麻醉,其中速眠新Ⅱ(0.05 mL/kg)的麻醉效果较好,麻醉所需时间为6.3 min,麻醉持续时间为47 min,无不良反应,肌肉注射,且简单易行;其次为戊巴比妥钠(0.9 mL/kg),麻醉所需时间为7.3 min,麻醉持续时间为63 min,会发生不良反应,肌肉注射会产生局部麻醉,需静脉注射;乌来糖(3.0 mL/kg),麻醉所需时间为5.0 min,麻醉持续时间为35 min,会发生不良反应,肌肉注射会产生局部麻醉,需静脉注射。2.筛选适合塔里木兔人工采精方法。采用不同采精方法(解剖取精法、电刺激法、按摩法)进行精液采集,检测采精量、精子活力、精子密度等指标,探讨不同采精方法对塔里木兔精液采集效果的影响。结果表明,3种采精方法均能采集到精液,其中按摩法采精法效果最佳,采精量较高达0.20 mL、精子活力平均为0.65以上、且操作简单易行;其次为电刺激法,最佳射精电压为0.1-3.0 V、采精量达0.15 mL、精子活力平均为0.45以上,但操作繁琐技术要求较高;与其相比解剖取精法虽精子活力平均为0.73以上,但需要屠宰公兔。3.筛选适合塔里木兔精液保存稀释液。公兔精液采用不同稀释液(生理盐水、配方1、2、3、4)按1:5比例稀释后,在室温(20-25℃)条件下保存,并在不同时间点(0、4、8 h)采样,检测精子活力、畸形率、质膜完整率等指标,通过持续保存法检测精子存活时间,探讨不同稀释液对塔里木兔精液保存效果的影响。结果表明,塔里木兔精液在5种稀释液中保存,随着保存时间的延长精子活力和质膜完整率逐渐下降(P<0.05),精子畸形率上升(P<0.05);精子在不同稀释液中保存8 h时,各试验组精子活力极显着高于对照组(生理盐水组)(0.74、0.76、0.68、0.69对0)(P<0.01),但各试验组之间无显着性差异(P>0.05);配2的精子存活时间最长(41 h),显着高于配1(37 h)、配3(30 h)、配4(28 h)(P<0.05),但配3与配4之间无显着性差异(P>0.05)。4.筛选塔里木兔精液保存稀释液pH值。采用前一个试验所筛选的稀释液(配2)pH调至6.2、7.2、8.2,在室温(20-25℃)条件下保存,并在不同时间点(0、4、8 h)采样,检测精子活力、畸形率、质膜完整率等指标,通过持续保存法检测精子存活时间,探讨稀释液pH值对塔里木兔精液保存效果的影响。结果表明,塔里木兔精液在不同pH值培养液中保存,随着保存时间的延长精子活力、质膜完整率逐渐下降(P<0.05),精子畸形率逐渐升高(P<0.05);pH 7.2组精子活力,在保存4、8 h时,极显着高于pH 6.2和pH 8.2组(0.74、0.73对0、0.26)(P<0.01);pH 7.2组,精子存活时间最长(42 h),极显着高于pH 6.2(2.5 h)、pH 8.2组(6 h)(P<0.01)。5.筛选塔里木兔精液保存方法。采用前一个试验所筛选的稀释液(配2,pH 7.2),在不同条件即低温(4-5℃)、室温(20-25℃)、恒温(37℃)下保存,并在不同时间点(0、4、8 h)采样,检测精子活力、畸形率、质膜完整率等指标,通过持续保存法检测精子存活时间,探讨不同保存方法对塔里木兔精液保存效果的影响。结果表明,塔里木兔精子在不同保存条件下保存,随着保存时间的延长精子活力、质膜完整率逐渐下降(P<0.05),精子畸形率逐渐升高(P<0.05);低温和常温保存组精子活力,在4、8 h时,极显着高于恒温保存组(0.81、0.78对0.45;0.71、0.76对0.31)(P<0.01),但低温和常温保存组之间无显着性差异(P>0.05);常温保存组精子存活时间最长(40 h)显着高于低温保存组(32 h)(P<0.05),极显着高于恒温保存组(13 h)(P<0.01)。6.精液保存稀释液的人工授精试验验证。塔里木兔精液,分别在5种精液保存常用的稀释液(生理盐水、配方1、2、3、4)中常温(20-25℃)保存2 h后进行人工授精,并与自然交配进行对比,记录受胎率及平均产仔数等指标,探讨不同稀释液对塔里木兔受胎及产仔效果的影响。结果表明,圈养塔里木兔自然交配受胎率为60%,均高于其它组(P<0.05),生理盐水、配方1、2、3、4组受胎率分别为20%、30%、40%、30%、30%、其中配方2的受胎效果较高达40%。
韩欢胜[4](2017)在《提高梅花鹿人工输精受胎率技术研究》文中进行了进一步梳理本研究的目的是进一步提高梅花鹿人工输精受胎率,发挥良种优势,为鹿人工输精技术推广应用提供理论参考依据和实践技术支撑,并增补梅花鹿繁殖研究的一些空白。梅花鹿繁殖规律调查研究结果显示,黑龙江省梅花鹿季节性发情规律基本是10月初进入发情期,发情集中时间是10月初到11月初,发情初期是10月初到10月中旬前后,发情盛期是10月中旬到11月初,发情末期是11月;发情持续时间平均为18.35±2.97h,范围是14-25.53 h,发情持续时间90.32%集中在14-22 h;发情周期平均为14.53±4.07d,范围是6-21 d;产后发情时间平均为128.75±8.42 d,范围是106-144 d;妊娠期239.28±9.57d,范围是223-260 d。研究结果表明,梅花鹿繁殖规律的变化在一定地区是相对固定的,发情持续时间、发情周期、产后发情时间和妊娠期都不是一个固定的时间,而是在一个相对固定的范围内分布。梅花鹿人工输精受胎率影响因素试验结果表明,在保证精液品质合格的前提下,不同种鹿的精液和不同类型的精液输精受胎率均无显着性差异(P>0.05);母体体况对受胎的影响,2-6岁不同参配年龄母鹿受胎率最高为93.33%、最低为37.03%,好、中、差不同膘情母鹿发情率分别为93.8%、75.0%、4.4%,不同产后发情时段输精受胎率从0.0%到100%,输精受胎率组间存在显着性差异(p<0.01),患子宫炎鹿第一情期受胎率11.76%,受胎率偏低;应激反应对受胎的影响,驯化组鹿发情率73.86%,较未驯化组鹿高7.65%,应激反应组鹿复发情率、流产率、发情不规律率分别是30.2%、4.7%、38.5%,高于应激组22.5%、2.5%、22.2%指标:发情鉴定对受胎的影响,用公鹿试情、同期发情、阴道细胞检查、人为观察及几种方法组合的发情鉴定方法进行发情鉴定并输精,输精受胎率分别是80%、42.63%、67.39%、52.0%、50.0%、71.43%,不同发情鉴定方法输精受胎率组间存在显着差异(p<0.01);常规冻精输精母鹿拒爬前后1 h内输精受胎率为83.3%,拒爬前后1 h外输精受胎率为51.9%,二者存在显着差异(p<0.01);性控冻精输精母鹿拒爬后4 h内各时段输精受胎率分别是100%、88.5%、88.9%、50%,不同输精时间受胎率存在大的差异;不同输精剂量的受胎效果比较显示,每次输精剂量有效精子数在200万个以上时,各组间输精受胎率无显着性差异(p>0.05);不同部位输精受胎率高低顺序是子宫体>子宫角>子宫颈,子宫颈三褶>子宫颈二褶>子宫颈口,不同部位间输精受胎率存在明显差异;不同输精方式输精受胎率高低顺序是直肠把握>开膣器>腹腔镜,不同输精方式输精受胎率存在明显差异;输精方法对受胎的影响,同期发情输精受胎率为45.71%,自然发情公鹿试情1次输精受胎率为63.89%,不同输精方法输精受胎率组间存在显着差异(p<0.01)。试验结果评估得出,母鹿体况、发情鉴定、输精时间与输精方法是限制梅花鹿受胎率进一步提高的关键影响因素。梅花鹿人工输精受胎率提高方法试验结果表明,配种期前优饲的母鹿组发情率为78.3%,较正常饲养组发情率66.7%提高11.6个百分点,配种期前优饲可加快繁殖母鹿子宫内环境恢复,使发情集中期提前,发情率的提高间接的保证了高的输精受胎率;冻精质量提高方法研究。对影响冻精质量关键因素研究表明,鲜精质量与冷冻效果密切相关,精液冷冻宜采用两步冷冻法,稀释液以Trilady稀释液为最优,平衡方法宜采用水浴降温法,平衡时间以2-3h为宜,试验进一步优化了精液冷冻程序,明显提高了冻精质量;通过发情期阴道细胞涂片法,总结了梅花鹿发情期阴道细胞变化规律,不同时期输精试验,确定常规冻精输精最适时期是发情盛期(Ⅰ期-Ⅲ期)。阴道细胞发情鉴定是提高人工输精受胎率的一种新的有效方法;通过比较不同输精方法的受胎率、劳动强度与经济效益,确定根据发情持续时间规律,采取公鹿试情2次输精方法是提高梅花鹿人工输精受胎率的最佳输精方法。根据梅花鹿的繁殖规律、受胎率的影响因素与提高方法的试验结果,提出人工输精受胎率提高的综合措施,首先,做好鹿群净化、精液达标、鹿群驯化和输精到位等前期工作;其次,掌握人工输精方法选择原则;第三,合理应用短期优饲、准确鉴情和适时输精等关键技术。
木沙·托合提,买买提江·阿布拉克,陈海燕,兰文旭,库尔班·吐拉克[5](2017)在《塔里木兔人工采精技术试验研究》文中研究指明塔里木兔(Lepus yarkandensis)为中国特有兔种,是国家Ⅱ级保护动物。近年来国内野兔需求市场日趋火爆,其巨大的经济效益,造成新疆塔里木兔偷捕盗猎、非法倒卖时有发生,并呈日益上升趋势。人工驯养繁殖是野生动物保护,种群延续、恢复种群数量与开发利用等工作中最为有效的方法之一。其中人工采精是首先要解决的技术问题。本文以塔里木兔为试验对象,采用3种麻药(速眠新Ⅱ、3%戊巴比妥钠、20%乌来糖)进行药物保定,并采用不同方法(解剖取精法、电刺激法、按摩法)进行精液采集,探索适合塔里木兔的麻药种类、剂量和采精方法。结果表明,3种麻醉药物均能有效诱导麻醉,其中速眠新Ⅱ(0.05 m L/kg)的麻醉效果最佳,其次为3%戊巴比妥钠(0.9 m L/kg),20%乌来糖(3.0 m L/kg)。本试验采用的3种采精方法来看,3种采精方法均能采集到精液,解剖取精法(对照组)精子活力较高,达0.70以上,但需要屠宰公兔。与其相比,按摩法采精法效果最佳,采精量达0.20 m L,精子活力达0.65以上且操作简单易行;其次为电刺激法,射精时电压为0.13.0 V,采精量达0.15 m L,精子活力为0.60左右。
刘士武[6](2014)在《神秘的鹿世界 京郊特养的典范》文中研究指明"呦呦鹿鸣,食野之苹",早在远古时代,鹿就成为人们崇拜的对象,古人有婚礼纳徵,用鹿皮为贽的风俗,鹿皮甚至是国家与诸侯之间交往的重要礼物。中国在商周时期就已开始养鹿。鹿是美丽、幸福、长寿、和平与富裕的象征,它的全身都是宝。近年来,北京市怀柔区为做大富民产业,结合当地的资源优势,制定了《茸鹿特色产业发展规划》,出台了一系列的农户引进养殖茸鹿扶持政策,鼓励农民养鹿致富。经过多年不断发展,杨宋镇、九渡河镇、长哨营等乡镇,逐渐形成怀柔茸鹿产业发展的一支生力军,带领更多的农民逐鹿成群奔富路。
王士勇[7](2014)在《梅花鹿、水貂、蓝狐及貉—牛异种体细胞核移植技术研究》文中研究表明为了探索梅花鹿-牛异种体细胞核移植技术,为梅花鹿胚胎工程研究奠定技术基础,本论文对其供核细胞的培养和冷冻保存、受体卵母细胞的体外成熟、显微操作、重组胚胎外培养等技术环节进行了探索研究,并在水貂、蓝狐和貉等毛皮动物上验证了建立的异种体细胞核移植技术体系。主要内容如下:(1)梅花鹿、水貂、蓝狐和貉耳皮肤成纤维细胞(Ear Skin Fibriblasts,ESF)经组织块法原代培养,利用酶消化时间差与贴壁时间差法处理3~5次纯化,结果显示细胞生长特点为贴壁生长、呈梭形、具伪足,F5代细胞生长曲线呈“潜伏期-对数生长期-停滞期”的模式。DMSO作为抗冻保护剂时,梅花鹿、水貂、蓝狐和貉ESF解冻复苏后复苏率分别为89.64%、92.44、91.24和91.04,显着高于甘油作为抗冻保护剂。结论:梅花鹿、水貂、蓝狐和貉ESF具有典型的皮肤成纤维细胞生长特点,通过酶消化时间与贴壁时间差的方法对其纯化可行,冷冻保存时可采用10%DMSO作为抗冻保护剂。(2)牛卵丘-卵母细胞复合体(Cumulus Oocyte Complexes,COCs)经22h体外成熟培养之后,LH+FSH和PMSG+HCG组成熟率分别为79.1%和75.2%,差异不显着,但是两组成熟率均显着高于对照组;牛COCs经(Brilliant Cresyl Blue, BCB)染色染色90min后卵母细胞着色率为68.1%,显着高于30、60min组,辨识难度为“中”;牛COCs经39μM的BCB染色后,着色率为64.5%,显着高于13μM组的29.3%;BCB+组和BCB-组的成熟率与对照组比较差异均不显着;在体外成熟培养液中添加50ng/mL表皮生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)后培养牛的COCs,22h后成熟率为77.4%,显着高于0、10、20ng/mL组。结论:在牛卵母细胞体外成熟培养液中添加国产激素10IU/mL PMSG、15IU/mL HCG和50ng/mL的EGF能显着提高其体外成熟率;BCB法筛选优质卵母细胞在本试验体系下不适用。(3)牛COCs经体外成熟20、21、22h后,0.4μg/mL脱羰秋水仙碱(Demecolcine,DEME)诱导显核率分别为61.0%、65.3%和66.7%,差异不显着;经0.4μg/mL DEME处理60、120min后,显核率分别为70.0%和71.9%,显着高于30min组;经0.5μg/mL DEME处理60min之后,显核率为78.9%,显着高于0.3、0.4μg/mL组;DEME辅助法的去核率为100.0%,显着高于挤压法和盲吸法,三种去核方法的去核时间差异不显着;带下注核与全细胞胞质内注核的成功率分别为100%和94.8%,注核时间分别为31.0s和35.1s,与破膜后胞质内注核比较差异均显着;一步操作和两步操作的相同注核方法处理组之间在激活率、卵裂率和囊胚率方面均无显着差异;0、0.25、0.50和1.00μM白藜芦醇对梅花鹿-牛ISCNT胚胎卵裂率没有显着影响,0.50和1.00μM组囊胚发育率分别为38.0%和36.7%,显着高于0、0.25μM组;梅花鹿-牛ISCNT胚胎用体细胞共培养时,水貂ESF组的卵裂率为55.7%,显着高于对照组,牛卵丘细胞组囊胚发育率为59.4%,显着高于对照组和其他两组。结论:梅花鹿-牛ISCNT研究可采用下面的技术程序:牛卵母细胞经IVM20~22h后,用0.5μg/mL DEME处理60min诱导显核,Pizeo辅助破膜胞质内注核的一步显微操作核移植,激活后的重组胚用牛卵丘细胞共培养。(4)采用Pizeo辅助全细胞胞质内注核的方法构建毛皮动物-牛ISCNT胚胎时,水貂、蓝狐和貉ESF作为供核细胞,在注核成功率、卵裂率和囊胚率之间差异不显着;牛卵丘细胞作为共培养细胞时,水貂、蓝狐、貉-牛ISCNT胚胎的囊胚率分别为43.6%、40.1%和42.1%,均显着高于对照组。结论:梅花鹿-牛ISCNT技术程序同样适用于水貂、蓝狐和貉等三种毛皮动物与牛的ISCNT。
鞠贵春,王丽丽,张辉[8](2011)在《梅花鹿良种繁育技术研究》文中提出梅花鹿是珍贵的药用动物,近几十年来,梅花鹿的良种繁育技术得到广泛应用。经过多年研究,梅花鹿良种大致应具备有良好的生产性能,系谱清楚,有典型特征,繁殖性能良好,适应力强等几个条件。梅花鹿的良种繁育包括选种选配、人工受精技术和胚胎移殖等。选种选配是梅花鹿良种繁育的关键和重要技术手段,而人工受精技术则大大提高了梅花鹿良种繁育速度和扩大了良种繁育范围。
高庆华[9](2009)在《精子流式分离和低剂量授精研究及XY精子差异表达基因筛选》文中进行了进一步梳理流式细胞高速分选术是被生产的后代证实有效的性别控制技术,可以获得高纯度的X、Y精子。该方法基于X和Y精子染色体DNA含量差别,采用活细胞荧光染料与精子DNA结合,分选获得活精子,随后用于子宫内人工授精或性控胚胎移植。分选冷冻精液低剂量人工授精在牛已被证明是一种有效的手段,能够生产表观正常的后代。而对其他物种、甚至人类,研究改进其精液分选和授精将促进该技术的推广应用,流式细胞分选的X和Y精子同时也是寻找其他性别控制方法的良好研究材料。本研究旨在将精子专用高速的流式细胞分选技术用于梅花鹿、马鹿和山羊,初步建立了梅花鹿、马鹿和山羊分选精液的低剂量授精技术体系和进一步对高纯度分选奶牛精液采用扣除杂交筛选,初步获得牛XY精子间的差异表达基因。获得如下结果:1.对16头种公马鹿电刺激采精,筛选比对天鹿3号稀释液的冷冻方法和甘油浓度,经冷冻处理,液氮保存,对冷冻精液品质和受胎效果进行评定。结果表明:马鹿对电刺激采精有耐受性,麻醉保定的采精频率每周2次最佳。甘油浓度6%的天鹿3号稀释液冷冻效果最优,细管冻精活率48.14±13.15%,顶体完整率为56.34±14.84%,126头诱导同期发情和107头自然发情马鹿人工授精的情期产羔率分别达到50.80%和78.50%。2.对电刺激或假阴道采集的马鹿、梅花鹿和山羊精液运输后流式分选、冷冻和低剂量授精。(1)马鹿X、Y精子纯度分别为93. 1%和95. 2%,解冻活率为46±5%和43±5%与常规对照精子活率43±6%没有明显差异,采用分选的106个有效精子对同期化发情的母鹿通过直肠把握授精生产15头性控后代,两性后代性别符合率均为100%,初生重和85d重及妊娠期与对照组比较均没有显着差异。(2)梅花鹿XY精子纯度分别为91.2%和94.1%,活率为45±4%和43±3%与常规对照精子活率43±4%没有明显差异,采用分选的106个有效精子对同期化发情的母花鹿通过腹腔镜授精生产20头性控后代,雌性后代性别符合率100%(5/5),雄性为92.9%(14/15)。初生重和85d重及妊娠期与对照组比较均没有显着差异。(3)萨能奶山羊XY精子纯度分别为94.4%和96. 2%,解冻活率为43±4%和42±4%,通过腹腔镜用分选的106个有效Y精子对同期化发情的母羊优势卵泡侧子宫角输精,生产出4头雄性后代,性别符合率为100%。初生重和70d重及妊娠期与对照组比较均没有显着差异。采用分选的低剂量106个有效精子通过腹腔镜或直肠把握子宫角授精可以生产健康的马鹿、梅花鹿和山羊的预知性别后代。3.流式细胞分选的冷冻马鹿精子对超数排卵供体采用直肠把握方法单次子宫体输精(对照组108有效精子,n=6;未分选组107有效精子,n=6;Y精子组107有效精子,n=6),成功生产出可供移植的性控雄性胚胎25枚;建立了一种有效的基于牙釉质基因DNA序列片段巢式扩增分析的胚胎性别鉴定的方法,对15枚常规马鹿胚胎样本(未分选精液授精)性别鉴定为8M:7F,4枚性控胚胎(分选Y精液授精)全部为雄性;移植后常规胚胎组受胎率(47.6%,20/42)和雄性胚胎组(42.9%,8/21)的差异不显着,雄性胚胎组的8头后代全部为雄性,明显偏离常规胚胎组11M:9F的后代性别比。4.采用Trizol结合E.Z.N.A.TM Total RNA kitⅡ离心层析柱方法对上游纯化的奶牛细管冷冻精子总RNA在2h内提取得到总RNA,OD260:OD280比值1.8,产量0.92μg/107精子,纯化精子总RNA的23SrRNA、Lep和Sry基因片段的RT-PCR产物电泳均获得目的条带且没有污染体细胞18S rRNA,可以用于后续的精子基因表达方面的研究。5.用流式细胞术分离的高纯度牛X精子和Y精子作为材料,在固相支持物磁珠上进行Y精子对X精子扣除杂交以富集性别差异表达基因,对扣除得到的Y-X差异mRNA采用Super SMART技术扩增,构建Y-X扣除杂交cDNA质粒库;克隆菌落PCR鉴定后,对27个有插入片段的克隆测序,BLAST分析均可以搜索到匹配的牛基因组序列,在线分析测得序列的同源性,结果比对上高度同源的4个EST序列,其中1个为牛已知Sry基因,3个为牛未知基因。
郑兴涛,王忠武,王柏林,马生良,常忠娟,姚文献[10](2006)在《马·花杂交F1的鲜茸产量和繁殖方法及探讨》文中进行了进一步梳理系统报道了48年来我国几个主要单位开展家养马鹿(♀)与梅花鹿(♂)杂交,即马.花杂交试验研究工作及其马.花杂交F154只290副茸的鲜茸产量和2只创记录者各锯龄的锯茸规格茸型和鲜茸产量、本交繁殖方法,并探讨了采用马鹿人工授精和同期发情等现代繁殖技术,大规模高效开展育成杂交,尤其清.双杂交和清.西杂交,乃至培育茸肉血兼用型鹿与该项最佳杂交组合的显效性,为养鹿业种鹿场、良繁体系、良繁基地和大型企业名牌鹿的产业化高效生产经营提供了新理念和科学依据。
二、梅花鹿人工授精配套新技术研究(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、梅花鹿人工授精配套新技术研究(论文提纲范文)
(1)梅花鹿定时输精技术的改进与生产应用(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 文献综述 |
1.1 鹿的重要价值及国内外鹿业发展现状 |
1.2 宁夏鹿产业概况 |
1.3 国内外梅花鹿的繁殖生理及输精技术应用现状 |
1.4 影响梅花鹿人工输精受胎率的因素 |
1.5 同期发情定时输精技术 |
1.5.1 同期发情技术的机理 |
1.5.2 同期发情常用的激素功能 |
1.5.3 奶牛CIDR同期发情定时输精程序 |
1.5.4 梅花鹿同期发情程序 |
1.6 同期发情中孕酮阴道栓丢失和引发感染的控制 |
1.6.1 常用孕酮阴道栓的结构及其优缺点 |
1.6.2 孕酮阴道栓在实践应用中存在的问题 |
1.7 研究应用的目的及意义 |
第二章 梅花鹿定时输精技术改进与生产应用 |
2.1 试验材料与方法 |
2.1.1 试验材料 |
2.1.2 试验方法 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 梅花鹿同期排卵技术的效果观察 |
2.2.2 腹腔镜法和开膣器法两种输精枪输精实践与对比 |
2.2.3 孕同期发情中孕酮阴道栓丢失和引发感染的控制技术实验结杲 |
2.2.3.1 添加抗生素控制感染和剪短栓尾防丢失的试验结果 |
2.2.3.2 改进器具控制感染和对折栓尾防丢失的效果观察试验结果 |
2.3 讨论 |
2.3.1 梅花鹿同期排卵技术 |
2.3.2 不同输精方法的输精效果和实用性比较 |
2.3.3 埋置孕酮阴道栓丢失和引发感染的控制 |
第三章 结论 |
3.1 梅花鹿同期排卵技术 |
3.2 适合推广的梅花鹿人工授精技术 |
3.3 埋置孕酮阴道栓丢失和引发感染的控制方法 |
参考文献 |
致谢 |
个人简介 |
(2)梅花鹿人工授精技术(论文提纲范文)
1 技术可行性 |
2 技术成熟程度 |
3 技术创新点 |
3.1 提高西丰梅花鹿母鹿妊娠率 |
3.2 解决个体养鹿配种难的问题 |
3.3 梅花鹿人工授精技术可提高优良种公鹿的利用率 |
3.4 提高后代鹿茸产量 |
(3)塔里木兔精液采集及其保存方法的研究(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
第1章 绪论 |
1.1 研究背景 |
1.1.1 塔里木兔生态习性 |
1.1.2 塔里木兔繁殖特性 |
1.1.3 塔里木兔资源现状 |
1.1.4 国内塔里木兔驯养繁育现状 |
1.2 哺乳动物精液采集及其保存技术研究进展 |
1.2.1 哺乳动物常用麻醉药物的应用及研究现状 |
1.2.2 哺乳动物精液采集技术的应用及研究现状 |
1.2.3 哺乳动物精液保存技术的研究进展 |
1.2.4 哺乳动物精液稀释液的研究现状及进展 |
1.2.5 兔精液保存效果的影响因素 |
1.2.6 兔人工授精技术的研究现状 |
1.3 研究目的及意义 |
1.4 技术路线 |
第2章 材料与方法 |
2.1 试验材料 |
2.1.1 试验动物 |
2.1.2 主要仪器及药品 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 试验动物的麻醉 |
2.2.2 精液的采精 |
2.2.3 精液的稀释 |
2.2.4 精液的保存 |
2.2.5 精液稀释液的配制 |
2.2.6 精液质量的检测 |
2.2.7 人工授精 |
2.2.8 自然配种 |
2.2.9 受胎率的评价 |
2.3 试验设计与分组 |
2.3.1 适宜塔里木兔麻醉药种类及剂量的筛选 |
2.3.2 适宜塔里木兔人工采精方法的筛选 |
2.3.3 适宜塔里木兔精液稀释液的筛选 |
2.3.4 适宜塔里木兔精液稀释液pH值的筛选 |
2.3.5 适宜塔里木兔精液保存方法的筛选 |
2.3.6 精液稀释液的人工授精试验验证 |
2.4 统计分析 |
第3章 结果与分析 |
3.1 麻醉药种类及剂量对塔里木兔麻醉效果的影响 |
3.2 不同采精方法对塔里木兔采精效果的影响 |
3.2.1 解剖取精法对塔里木兔采精效果的影响 |
3.2.2 电刺激法对塔里木兔采精效果的影响 |
3.2.3 按摩法对塔里木兔采精效果的影响 |
3.3 不同稀释液对塔里木兔精液保存效果的影响 |
3.3.1 不同稀释液对塔里木兔精子活力及存活时间的影响 |
3.3.2 不同稀释液对塔里木兔精子畸形率的影响 |
3.3.3 不同稀释液对塔里木兔精子质膜完整率的影响 |
3.4 稀释液PH值对塔里木兔精液保存效果的影响 |
3.4.1 稀释液pH值对精子活力及存活时间的影响 |
3.4.2 稀释液pH值对塔里木兔精子畸形率的影响 |
3.4.3 稀释液pH值对塔里木兔精子质膜完整率的影响 |
3.5 不同保存方法对塔里木兔精液保存效果的影响 |
3.5.1 不同保存方法对塔里木兔精子活力及存活时间的影响 |
3.5.2 不同保存方法对塔里木兔精子畸形率的影响 |
3.5.3 不同保存方法对塔里木兔精子质膜完整率的影响 |
3.6 不同稀释液对塔里木兔受胎及产仔效果的影响 |
第4章 讨论 |
4.1 麻药剂量及其种类对塔里木兔麻醉效果的影响 |
4.2 不同采精方法对塔里木兔采精效果的影响 |
4.3 不同稀释液对塔里木兔精液保存效果的影响 |
4.4 不同PH值对塔里木兔精液保存效果的影响 |
4.5 不同保存方法对塔里木兔的精液保存效果的影响 |
4.6 不同稀释液对塔里木兔受胎率的影响 |
第5章 结论 |
参考文献 |
致谢 |
作者简介 |
(4)提高梅花鹿人工输精受胎率技术研究(论文提纲范文)
摘要 |
英文摘要 |
1 引言 |
1.1 文献综述 |
1.1.1 鹿的重要价值 |
1.1.2 国内外鹿业发展现状 |
1.1.3 梅花鹿繁殖规律研究进展 |
1.1.4 梅花鹿人工授精技术研究进展 |
1.2 研究的目的和意义 |
2 材料与方法 |
2.1 试验材料 |
2.1.1 试验动物与精液 |
2.1.2 试验器材 |
2.1.3 试验药品与试剂 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 梅花鹿繁殖规律调查研究 |
2.2.2 梅花鹿人工输精受胎率影响因素试验方法 |
2.2.3 梅花鹿人工输精受胎率提高试验方法 |
2.3 数据处理 |
3 结果与分析 |
3.1 梅花鹿繁殖规律调查研究结果 |
3.1.1 发情季节规律 |
3.1.2 发情持续时间 |
3.1.3 发情周期 |
3.1.4 产后发情时间 |
3.1.5 妊娠期 |
3.2 梅花鹿人工输精受胎率影响因素试验结果 |
3.2.1 精液品质对人工输精受胎率的影响 |
3.2.2 母鹿体况对人工输精受胎率的影响 |
3.2.3 应激对人工输精受胎率的影响 |
3.2.4 发情鉴定对人工输精受胎率的影响 |
3.2.5 输精时间对人工输精受胎率的影响 |
3.2.6 输精剂量对人工输精受胎率的影响 |
3.2.7 输精部位对人工输精受胎率的影响 |
3.2.8 输精方式对人工输精受胎率的影响 |
3.2.9 输精方法对人工输精受胎率的影响 |
3.3 梅花鹿人工输精受胎率提高方法试验结果 |
3.3.1 发情率提高方法 |
3.3.2 冻精质量提高方法 |
3.3.3 阴道细胞发情鉴定与适时输精 |
3.3.4 人工输精创新方法 |
3.3.5 人工输精受胎率提高综合措施 |
4 讨论 |
4.1 梅花鹿繁殖规律 |
4.1.1 梅花鹿发情季节规律 |
4.1.2 发情持续时间 |
4.1.3 发情周期 |
4.1.4 产后发情时间 |
4.1.5 妊娠期 |
4.2 梅花鹿人工输精受胎率影响因素 |
4.2.1 精液品质对人工输精受胎率的影响 |
4.2.2 母鹿体况对人工输精受胎率的影响 |
4.2.3 应激对人工输精受胎率的影响 |
4.2.4 发情鉴定对人工输精受胎率的影响 |
4.2.5 输精时间对人工输精受胎率的影响 |
4.2.6 输精剂量对人工输精受胎率的影响 |
4.2.7 输精部位对人工输精受胎率的影响 |
4.2.8 输精方式对人工输精受胎率的影响 |
4.2.9 输精方法对人工输精受胎率的影响 |
4.3 梅花鹿人工输精受胎率提高方法 |
4.3.1 发情率提高方法 |
4.3.2 冻精质量提高方法 |
4.3.3 阴道细胞发情鉴定与适时输精 |
4.3.4 人工输精方法 |
5 结论 |
致谢 |
参考文献 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 |
(5)塔里木兔人工采精技术试验研究(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.1.1 试验动物 |
1.1.2 主要仪器及药品 |
1.2 试验方法 |
1.2.1 分组设计 |
1.2.1. 1 麻醉药以及剂量的筛选 |
1.2.1. 2 人工采精方法的筛选 |
1.2.2 采精方法 |
1.2.2. 1 解剖取精 |
1.2.2. 2 电刺激采精 |
1.2.2. 3 按摩采精 |
1.2.3 精子活力和密度的评价 |
1.2.4 统计分析 |
2 结果 |
2.1 麻药剂量及种类对塔里木兔麻醉效果的影响 |
2.2 不同方法对塔里木兔采精效果的影响 |
2.2.1 解剖取精法 |
2.2.2 电刺激法对塔里木兔采精效果的影响 |
2.2.3 按摩法对塔里木兔采精效果的影响 |
3 讨论 |
3.1 麻药剂量及其种类对塔里木兔麻醉效果的影响 |
3.2 不同方法对野生动物采精效果的影响 |
(6)神秘的鹿世界 京郊特养的典范(论文提纲范文)
梅花鹿可以吃了 |
养鹿之前先办证 |
(7)梅花鹿、水貂、蓝狐及貉—牛异种体细胞核移植技术研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
英文缩略表 |
第一章 绪论 |
1.1 梅花鹿的繁殖特点及繁育生物技术 |
1.1.1 梅花鹿的繁殖特点 |
1.1.2 梅花鹿的繁育生物技术 |
1.2 水貂、蓝狐及貉的经济价值与繁育生物技术 |
1.2.1 水貂的经济价值与繁育生物技术 |
1.2.2 蓝狐和貉的经济价值与繁育生物技术 |
1.3 异种体细胞核移植技术研究进展 |
1.3.1 ISCNT 研究历史 |
1.3.2 ISCNT 关键技术环节 |
1.3.3 ISCNT 的研究意义 |
1.3.4 ISCNT 研究存在的问题 |
1.4 本研究的内容、目的及意义 |
1.4.1 梅花鹿、水貂、蓝狐和貉耳皮肤成纤维细胞培养及冷冻保存 |
1.4.2 牛卵母细胞体外成熟培养条件的优化 |
1.4.3 梅花鹿-牛 ISCNT 技术方法的研究 |
1.4.4 水貂、蓝狐及貉-牛 ISCNT 胚胎的制备 |
第二章 供核细胞培养及冷冻保存 |
2.1 材料和方法 |
2.1.1 材料 |
2.1.2 方法 |
2.1.3 试验设计 |
2.1.4 统计分析 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 梅花鹿、水貂、蓝狐和貉耳皮肤成纤维细胞的生长特性 |
2.2.3 DMSO 和甘油对不同供核细胞的冷冻保护效果 |
2.3 讨论 |
2.3.1 梅花鹿、水貂、蓝狐和貉耳皮肤成纤维细胞的培养 |
2.3.2 梅花鹿、水貂、蓝狐和貉耳皮肤成纤维细胞的纯化 |
2.3.3 梅花鹿、水貂、蓝狐和貉耳皮肤成纤维细胞的冷冻保存 |
2.4 小结 |
第三章 牛卵母细胞体外成熟体系的优化 |
3.1 材料和方法 |
3.1.1 材料 |
3.1.2 方法 |
3.1.3 测定指标与评定方法 |
3.1.4 统计分析 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 不同激素组合对牛卵母细胞体外成熟的影响 |
3.2.2 BCB 染色优选牛卵母细胞体外成熟 |
3.2.3 EGF 对牛卵母细胞体外成熟的影响 |
3.3 讨论 |
3.3.1 激素对牛卵母细胞体外成熟的影响 |
3.3.2 BCB 染色对牛卵母细胞体外成熟的作用 |
3.3.3 EGF 对牛卵母细胞体外成熟的影响 |
3.4 小结 |
第四章 梅花鹿-牛 ISCNT 技术研究 |
4.1 材料和方法 |
4.1.1 材料 |
4.1.2 方法 |
4.1.4 统计分析 |
4.2 结果与分析 |
4.2.1 DEME 诱导牛卵母细胞显核的研究 |
4.2.2 梅花鹿-牛 ISCNT 显微操作的研究 |
4.2.3 梅花鹿-牛 ISCNT 胚胎体外培养的研究 |
4.3 讨论 |
4.3.1 DEME 处理对牛卵母细胞显核的影响 |
4.3.2 梅花鹿-牛 ISCNT 显微操作 |
4.3.3 梅花鹿-牛 ISCNT 胚胎体外培养 |
4.4 小结 |
第五章 水貂、蓝狐及貉-牛 ISCNT 胚胎的制备 |
5.1 材料和方法 |
5.1.1 材料 |
5.1.2 方法 |
5.1.3 试验设计 |
5.1.4 统计分析 |
5.2 结果与分析 |
5.2.1 供核细胞对全细胞胞质内注射制备 ISCNT 胚胎的影响 |
5.2.2 共培养对毛皮动物-牛 ISCNT 胚胎体外发育的影响 |
5.3 讨论 |
5.3.1 供核细胞对全细胞胞质内注射制备 ISCNT 胚胎的影响 |
5.3.2 共培养对水貂、蓝狐及貉-牛 ISCNT 胚胎体外发育的影响 |
5.4 小结 |
第六章 全文结论 |
6.1 结论 |
6.2 研究的创新点 |
6.3 后续研究工作 |
参考文献 |
致谢 |
作者简介 |
(8)梅花鹿良种繁育技术研究(论文提纲范文)
1 梅花鹿良种的界定 |
2 梅花鹿良种繁育技术 |
2.1 梅花鹿良种繁育取得的成果 |
2.2 梅花鹿良种繁育技术 |
2.2.1 梅花鹿的选种选配 |
2.2.1. 1 梅花鹿的选种 |
2.2.1. 2 梅花鹿的选配 |
2.2.2 梅花鹿的人工授精技术 |
2.2.3 合理利用品种资源, 优化群体结构 |
3 梅花鹿良种繁育技术展望 |
(9)精子流式分离和低剂量授精研究及XY精子差异表达基因筛选(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 文献综述 |
1.1 哺乳动物性别控制技术 |
1.1.1 性别控制的理论和现实意义 |
1.1.2 流式分选XY 精子为基础的性别控制技术 |
1.1.3 较为安全的精子流式分选技术的研究 |
1.1.4 性别控制DNA 疫苗的研究 |
1.2 哺乳动物X、Y 精子分离研究进展 |
1.2.1 流式细胞检索仪精子分离法的研究及应用状况 |
1.2.2 其他X、Y 精子分离的技术方法和应用 |
1.2.3 X、Y 精子分离技术研究展望 |
1.3 哺乳动物性控DNA 疫苗 |
1.3.1 哺乳动物性控疫苗研究的免疫学基础 |
1.3.2 哺乳动物性控疫苗研究的分子基础 |
1.3.3 性控DNA 疫苗的定义 |
1.3.4 性控DNA 疫苗的对象和性别控制的实现途径 |
1.3.5 利用XY 精子性别特异性基因表达为基础的性控疫苗研究现状 |
1.3.6 性控DNA 疫苗技术的展望 |
1.4 XY 精子性别差异表达基因筛选技术 |
1.4.1 精子RNA 提取和定量 |
1.4.2 差异表达基因筛选研究方法 |
1.4.3 生物信息学分析进展 |
1.5 研究的目的 |
第二章 鹿冷冻精液制备及人工授精试验 |
2.1 前言 |
2.2 材料和方法 |
2.2.1 材料 |
2.2.2 方法 |
2.3 结果 |
2.3.1 不同电刺激采精频率马鹿的采精效果 |
2.3.2 天山马鹿射精电压 |
2.3.3 细管冻精制作工艺的筛选 |
2.4 讨论 |
2.5 小结 |
第三章 马鹿、梅花鹿和奶山羊XY 精子流式分选及人工授精 |
3.1 前言 |
3.2 材料与方法 |
3.2.1 试验材料 |
3.2.2 试验方法 |
3.3 结果 |
3.3.1 马鹿精液的分选及授精结果 |
3.3.2 梅花鹿精液的分选及授精结果 |
3.3.3 奶山羊精液分选和人工授精结果 |
3.4 讨论 |
3.4.1 关于马鹿分选精子和低剂量直肠把握输精 |
3.4.2 关于梅花鹿精子分选和低剂量腹腔镜人工授精 |
3.4.3 关于奶山羊精子分选和输精剂量 |
3.4.4 关于分选精液后代的安全性评价 |
3.4.5 关于分选精子的应用 |
3.5 小结 |
第四章 马鹿性控胚胎生产 |
4.1 前言 |
4.2 材料和方法 |
4.2.1 材料 |
4.2.2 方法 |
4.3 结果 |
4.3.1 性控胚胎生产 |
4.3.2 胚胎性别鉴定 |
4.3.3 胚胎移植 |
4.4 讨论 |
4.5 小结 |
第五章 奶牛精子RNA 提取及质量评定 |
5.1 前言 |
5.2 材料和方法 |
5.2.1 材料 |
5.2.2 主要试剂和仪器 |
5.2.3 方法 |
5.3 结果 |
5.3.1 奶牛细管冻精优化和总RNA 提取结果 |
5.3.2 奶牛细管冻精总RNA 的RT-PCR |
5.4 讨论 |
5.4.1 奶牛细管冻精RNA 提取 |
5.4.2 奶牛细管冻精RNA 检测 |
5.5 小结 |
第六章 奶牛X、Y 精子性别差异表达基因筛选 |
6.1 前言 |
6.2 材料和方法 |
6.2.1 材料 |
6.2.2 主要试剂和仪器 |
6.2.3 方法 |
6.3 结果 |
6.3.1 奶牛高纯度XY 精子流式分选结果 |
6.3.2 奶牛Y-X 精子扣除杂交结果 |
6.3.3 奶牛Y-X 精子扣除杂交cDNA 的测序和分析 |
6.4 讨论 |
6.5 小结 |
结论 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
作者简介 |
四、梅花鹿人工授精配套新技术研究(论文参考文献)
- [1]梅花鹿定时输精技术的改进与生产应用[D]. 张鑫. 宁夏大学, 2020(03)
- [2]梅花鹿人工授精技术[J]. 杨鹏. 畜牧兽医科技信息, 2018(06)
- [3]塔里木兔精液采集及其保存方法的研究[D]. 木沙·托合提. 新疆农业大学, 2017(02)
- [4]提高梅花鹿人工输精受胎率技术研究[D]. 韩欢胜. 东北农业大学, 2017(05)
- [5]塔里木兔人工采精技术试验研究[J]. 木沙·托合提,买买提江·阿布拉克,陈海燕,兰文旭,库尔班·吐拉克. 野生动物学报, 2017(02)
- [6]神秘的鹿世界 京郊特养的典范[J]. 刘士武. 北京农业, 2014(28)
- [7]梅花鹿、水貂、蓝狐及貉—牛异种体细胞核移植技术研究[D]. 王士勇. 中国农业科学院, 2014(10)
- [8]梅花鹿良种繁育技术研究[J]. 鞠贵春,王丽丽,张辉. 吉林中医药, 2011(03)
- [9]精子流式分离和低剂量授精研究及XY精子差异表达基因筛选[D]. 高庆华. 西北农林科技大学, 2009(10)
- [10]马·花杂交F1的鲜茸产量和繁殖方法及探讨[J]. 郑兴涛,王忠武,王柏林,马生良,常忠娟,姚文献. 经济动物学报, 2006(03)