一、甘薯及其近缘野生种Ipomoea lacunosa愈伤组织植株再生（论文文献综述）
王婷[1]（2019）在《甘薯miR2111、miR156及其靶基因的鉴定和功能研究》文中研究说明紫心甘薯（紫薯）块根富含花青素,对调节机体免疫、抗癌、降血糖、保护心血管等方面有积极作用。MicroRNAs（miRNAs）是内源性非编码小RNA,对植物生长发育、胁迫应答以及次生代谢产物积累等生物过程中起着重要作用。目前有关miRNA在转录后水平对紫薯地下块根花青素生物合成机制尚不清楚。本课题组前期通过转录组、小RNA测序和降解组多组学分析具有121个miRNA在紫薯与白薯中差异表达,其中26个miRNA作用于36个靶基因参与甘薯花青素的合成。本研究对Ib-miR2111和Ib-miR156在甘薯花青素生物合成中的作用进行了研究,结果如下:1.克隆获得355bp的Ib-pri-MIR2111序列。降解组测序和qRT-PCR分析发现Ib-miR2111的靶基因是IbZFP（Zinc finger protein,锌指蛋白）,克隆获得IbZFP,其DNA与ORF总长都为1290 bp,编码429个氨基酸,具有LabALike和锌指结构域,属于C2H2类锌指结构中的C2-1iC型。Ib-miR2111在紫薯块根中的表达量高于白薯,相反IbZFP的表达模式与Ib-miR2111相反,推测IbZFP的表达可能受Ib-miR2111调控。白薯和紫薯不同组织的表达特异性分析表明:无论白薯和紫薯中,Ib-miR2111在块根中的表达量最高,叶中的表达量最低,而IbZFP相应组织中的表达模式相反。进一步分析发现,和紫薯相比,Ib-miR2111在白薯地上器官（叶、叶柄、茎）中的表达量高,而在地下块根中Ib-miR2111的表达量显着低于紫薯,与IbZFP的表达模式相反,表明Ib-miR2111-IbZFP调控的甘薯块根花青素积累可能存在地上部分向地下部分的转移机制。分别构建Ib-pri-MIR2111及IbZFP的过表达与CRISPR/Cas9敲除植物表达载体,并获得Ib-pri-MIR2111过表达与敲除表达转基因拟南芥植株。和野生型相比,过表达Ib-pri-MIR2111的转基因拟南芥植株中miR2111表达量升高,花青素合成相关酶基因（AtCHS、AtCHI、AtDFR、AtANS）的表达量均上升,转基因植株的主茎底部呈现明显深于野生型的紫色,表明Ib-miR2111对花青素合成起正调控作用。2.克隆获得615bp的Ib-pri-MIR156前体序列。降解组测序和qRT-PCR分析发现Ib-miR156的靶基因是IbSPL2（SQUAMOSA promoter binding protein-like 2）。IbSPL2 DNA全长2960bp,基因结构有4个外显子、3个内含子,ORF长1269bp,编码422个氨基酸,具有SBP保守结构域。Ib-miR156紫薯块根中的表达量高于白薯,相反IbSPL2的表达模式与Ib-miR156相反;组织特异性表达分析Ib-miR156在叶和叶柄中的表达量高,而IbSPL2与之相反,在根中的表达最高;不同块根发育时期Ib-miR156在90天块根中的表达量高于其它时期,与IbSPL2呈调控关系,推测IbSPL2的表达可能受Ib-miR156调控;缺磷胁迫处理“五叶一心”期的甘薯苗表达量表明Ib-miR156-IbSPL2模式响应缺磷胁迫,同时还受到其他因子的调节。构建了Ib-pri-MIR156与IbSPL2过表达载体,并获得Ib-pri-MIR156过表达转基因拟南芥植株。和野生型相比,过表达Ib-pri-MIR156的转基因拟南芥植株中miR156表达量升高,花青素合成相关酶基因（AtCHS、AtCHI、AtDFR、AtANS）的表达量均上升,转基因植株的主茎与幼期叶片呈现紫色,表明Ib-miR156正调控花青素的生物合成。3.利用甘薯二倍体近缘野生种三裂叶薯的全基因组信息对SPL基因家族进行了分析鉴定,获得不均匀分布于12条染色体上的26个ItbSPL基因家族成员。根据拟南芥AtSPL基因家族的分类标准将该26个ItbSPL家族基因成员分为7组。进一步利用拟南芥中已知功能的SPL对ItbSPL基因的功能进行预测到三裂叶薯ItbSPL基因家族成员与植物开花、逆境胁迫、次生代谢等生物学过程相关。PsRNA target预测、qRT-PCR试验验证其中13个ItbSPLs是miR156的靶基因。4.目前已成功建立胚性悬浮细胞的再生体系,甘薯的胚性悬浮细胞愈伤转化进行到再生胚状体诱导。综上,本研究首次在甘薯中分别克隆了Ib-miR2111和Ib-miR156,鉴定其靶基因分别为IbZFP和IbSPL2。通过定量表达与过表达转基因拟南芥植株,证明Ib-miR2111和Ib-miR156正调控花青素的生物合成。以上研究结果丰富了植物花青素生物合成理论,有助于解析深埋于地下的甘薯块根花青素调控机制,也为通过基因工程手段调控植物花青素含量提供了新靶标。
杨义伶,张雄坚,姚祝芳,罗忠霞,邹宏达,王章英,黄立飞,房伯平[2]（2018）在《甘薯杂交不亲和性研究进展》文中认为甘薯是一种重要的粮食作物,块根中具有高含量的淀粉和丰富的营养物质。在甘薯育种中,杂交育种为其主要育种途径,但因甘薯种内及种间存在较高程度杂交不亲和性,对甘薯育种亲本的选择及种质资源的利用造成了严重的限制。为了克服甘薯杂交不亲和性,国内外学者针对不亲和性机理及克服方法开展了大量研究,主要包括甘薯种内不孕群的划分、甘薯种内和种间杂交不亲和性生理及分子遗传机制的研究、甘薯杂交不亲和性克服试剂的筛选、体细胞杂交对甘薯种内及种间杂交不亲和性的克服等。主要从以上各方面对相关研究进展进行综述和讨论,以期为甘薯杂交不亲和性的克服及相关机理的研究提供参考。
李丽,李云[3]（2016）在《甘薯及其近缘野生种三浅裂野牵牛（Ipmoea trifida）原生质体融合的初步研究》文中研究表明利用酶解法从贵州省甘薯地方品种兴义薯和二倍体近缘野生种三浅裂野牵牛（I.trifida）的无菌试管苗幼嫩叶柄中分离得到大量原生质体。用聚乙二醇（PEG）融合法融合这2个品种的原生质体,将融合原生质体培养在含有0.05 mg/L 2,4-D和0.5 mg/L KT的改良MS培养基中。结果表明,35 d后融合原生质体发生第1次细胞分裂;培养12周后,形成直径达12 mm的小愈伤组织。将这些小愈伤组织转移到含有0.05 mg/L 2,4-D和0.5 mg/L KT的MS培养基上,使愈伤组织增殖。
贾礼聪[4]（2016）在《甘薯及其近缘野生种种间体细胞杂种的特性鉴定与遗传组成分析》文中研究指明甘薯（lpomoea batatas（L.）Lam.）是重要的块根作物,广泛种植于热带和亚热带100多个国家和地区。甘薯近缘野生资源相当丰富,并且存在许多甘薯不具有的优良基因。研究表明,体细胞杂交能有效克服甘薯及其近缘野生种存在的有性杂交不亲和的障碍,使得这些优良的基因资源能够被有效地利用到甘薯的遗传改良中。为了开发和利用甘薯近缘野生种的优良基因,本研究对本研究室已经获得的3个具有膨大块根的甘薯品种与近缘野生种之间的种间体细胞杂种XT1（徐薯 18+I.triloba）、KT1（高系 14 号+I.triloba）和 XL1（徐薯 18+I.lacunosa）的特性和遗传组成进行了较系统的研究。主要结果如下:1、对XT1进行了 RAPD、细胞学和形态学鉴定。通过对XT1及其亲本植株进行离体、盆栽和大田的抗旱性系统鉴定,表明XT1的抗旱性显着高于徐薯18。在干旱胁迫下,XT1的脯氨酸和SOD和CAT活性以及光合活性显着高于徐薯18,而MDA含量显着低于徐薯18。对XT1及其栽培种亲本徐薯18块根品质的评价结果显示,XT1的可溶性糖和粗蛋白含量均显着高于徐薯18。用SSR和AFLP技术对XT1的基因组进行分析,结果表明其基因组含有双亲的特异条带和改变的条带。用MSAP技术对XT1的表观遗传变异进行分析,结果表明XT1的胞嘧啶甲基化位点由双亲的特异位点和改变的位点组成。进一步分析显示,XT1中栽培种亲本特异的基因组条带和甲基化位点比例显着高于野生种亲本的比例。RNA-seq分析表明XT1的基因表达模式与徐薯18相近。XT1具有与徐薯18相同的叶绿体和线粒体基因组组成。通过RNA-seq和qRT-PCR分析,认为XT1抗旱性优于徐薯18的机制为:XT1遗传了I.triloba的干旱胁迫响应相关基因,这些基因在干旱胁迫下显着上调表达。2、通过对KT1及其亲本植株进行离体、盆栽的抗旱性系统鉴定,表明KT1的抗旱性显着高于高系14号。在干旱胁迫下,KT1的脯氨酸含量、SOD活性和光合活性显着高于高系14号,而MDA含量显着低于高系14号;抗旱相关基因在KT1中的表达水平显着高于高系14号。用SSR、AFLP和MSAP技术对本研究室获得的甘薯品种高系14号与I.triloba的种间体细胞杂种KT1的遗传和表观遗传变异进行分析,表明KT1的基因组含有双亲的特异条带和改变的条带,KT1的胞嘧啶甲基化位点由双亲的特异位点和改变的位点组成;KT1中高系14号特异的基因组条带和甲基化位点比例显着高于I.triloba的比例。RNA-seq分析表明,KT1的基因表达模式与高系14号相近。KT1具有与高系14号相同的叶绿体和线粒体基因组组成。通过RNA-seq和qRT-PCR分析,认为KT1抗旱性优于高系14号的机制为:KT1遗传了其野生种亲本I.triloba的干旱胁迫响应相关基因,这些基因在干旱胁迫下显着上调表达。3、通过对XL1及其亲本植株进行离体的重金属铝和铬的耐受性鉴定,表明XL1对重金属铝和铬的耐受性显着高于徐薯18。在不同浓度铝和铬胁迫下,XL1的脯氨酸含量、SOD和CAT活性显着高于徐薯18,而MDA含量显着低于徐薯18。用SSR、AFLP和MSAP技术对本研究室获得的徐薯18与I.lacunoas的种间体细胞杂种XL1的遗传和表观遗传变异进行分析,表明XL1的基因组含有双亲的特异条带和改变的条带,XL1的胞嘧啶甲基化位点由双亲的特异位点和改变的位点组成;XL1中徐薯18特异的基因组条带和甲基化位点比例显着高于I.lacunosa的比例。XL1具有与徐薯18相同的叶绿体和线粒体基因组组成。本研究进一步证明了体细胞杂交在甘薯遗传改良上的重要作用,同时本研究结果将有助于甘薯近缘野生种中的有益基因发掘,也有助于进一步理解甘薯栽培种的进化和系统发育。
闫会[5]（2013）在《表达Cu/ZnSOD和APX的转基因甘薯植株的再生与耐盐性评价》文中进行了进一步梳理本研究以徐薯18、徐薯55-2、徐薯22、徐薯28、徐薯29和徐紫薯5号等6个甘薯主栽品种（系）为材料，通过比较不同品种胚性愈伤组织诱导率、愈伤状态、悬浮系状态及保存时间上的差异，筛选出一种愈伤诱导率高，悬浮细胞增殖迅速，分散性好，总体表现优良的基因型徐薯55-2。以该基因型胚性愈伤为材料，研究了ABA在甘薯体细胞胚诱导和植株再生中的作用，结果表明ABA可诱导体细胞胚的发生但抑制植株的再生。并筛选出了最佳的ABA浓度和处理时间，建立了一种适合多个甘薯品种的高效快速体胚诱导和植株再生体系：将胚性愈伤在含有1.0mg/lABA的MS培养基上培养7d，然后转移至MS基本培养基上继续培养，可快速获得再生植株。通过头孢霉素（cefotaxime sodium，Cef）对农杆菌EHA105的抑菌实验，确定了抑菌抗生素Cef的浓度为200mg/l。本实验确定了徐薯55-2遗传转化4个关键阶段：液体选择培养阶段、固体选择培养阶段、体胚诱导和再生阶段的选择压分别为Kan10、10、15和5mg/l。以徐薯55-2的胚性悬浮系为材料，以EHA105为供体菌株，在质粒PCAMBIA2300的多克隆位点构建含有目的基因Cu/Zn SOD和APX的SSA表达载体，筛选标记基因为NPTⅡ。将达到对数生长期的根癌农杆菌稀释到OD=0.5，侵染继代后3d的愈伤10min，然后转移至含20mg/l乙酰丁香酮（scetosyringone，AS）的MS固体培养基上共培养3d。经600mg/l的Cef抑菌处理1h后，将转化的愈伤在含2.0mg/l2,4-D、200mg/l Cef和10mg/l Kan的MS固体培养基上进行选择培养。68w后，由1050个胚性细胞团共筛选获得76个Kan抗性愈伤组织。将获得的抗性愈伤组织转移到添加1.0mg/l ABA和15mg/l Kan的MS固体培养基上1w，然后将愈伤转移至含5mg/l Kan的MS固体培养基上诱导体细胞胚的分化及植株再生。从获得的598株拟转基因植株中随机抽取85株进行PCR鉴定，阳性植株为79株，阳性率为92.9%。随机选取11株阳性植株进行Southern blot检测，转基因株系外源基因插入拷贝数为13个，表明外源基因已整合到甘薯的基因组中。随机抽取徐薯55-2转基因植株进行耐盐鉴定。在含有0.5%NaCl的营养土中培养2w后，对照植株长势差，生根困难，而转基因植株基本正常生长。转基因植株叶绿素含量下降较慢，MDA含量和相对电导率均显着低于对照，表明部分转基因株系的耐盐性有明显提高。经耐盐筛选和生理指标鉴定，初步筛选出徐薯55-2的耐盐转基因株系3个。
周志林,唐君,张允刚,赵冬兰[6]（2009）在《甘薯种质创新技术及其创新材料》文中进行了进一步梳理种质创新作为甘薯育种的基础,对甘薯育种的发展起非常重要的作用。本文对通过有性杂交、体细胞杂交、理化诱变创新甘薯种质进行了总结归纳:对于杂交亲和组合,可通过嫁接诱导及短日照处理诱导开花,同时配合激素处理,加大近缘野生资源利用,提高结实率;对杂交不亲和组合可以通过体细胞杂交、激素处理结合子房、胚珠培养等克服杂交不亲和;遗传转化可打破基因连锁,创新种质;单倍体诱导的适宜期为单核期;自然变异、辐射诱变及化学诱变为有益突变体获得的主要途径;嫁接技术为基因水平转移开辟了一条新的途径;同时对今后甘薯种质创新技术研究的方向进行了展望。
刘春月[7]（2009）在《甘薯高频再生体系建立及离体诱变筛选耐盐突变体的初步研究》文中认为本论文以甘薯无菌试管苗为材料,分别以茎段、叶片、叶柄为外植体建立高频再生体系,并对离体再生培养基进行了优化,提高了芽分化率,并诱导出了丛生芽,实现了高效再生。以4个不同基因型的茎段愈伤组织为试材进行了耐盐突变体的辐射诱变及筛选研究,初步建立了耐盐突变体诱变筛选的技术体系。结果如下:1.通过正交实验,筛选出了甘薯愈伤组织的最佳诱导培养基为MS + 1.0 mg/L NAA + 0.5 mg/L BA,最佳外植体为茎段;愈伤组织生根率主要受NAA浓度的影响,在所有外植体中茎分化根的能力最强,叶柄次之,叶片分化根的能力最弱。2.通过实验,筛选出愈伤组织分化的最佳培养基是MS + 0.02 mg/L 2,4-D + 1.0 mg/L KT;通过在最佳分化培养基中添加AgNO3,提高了愈伤组织的分化率,并且诱导出丛生芽,其中AgNO3的最佳含量为4 mg/L,诱导出的不定芽可以在MS培养基中多次继代,实现扩繁。3.本实验确定了80Gy的辐射剂量为适宜甘薯茎段愈伤组织的诱变剂量;经过初步筛选获得了NaCl最大耐受浓度1.5%,比对照提高0.5%;通过对耐盐突变体的生理生化指标的测定,表明耐盐突变体的叶绿素含量和丙二醛含量均低于对照,游离脯氨酸含量高于对照,耐盐突变体表现出较强的耐盐潜力;离体鉴定表明耐盐突变体后代仍保持耐盐性。
李强,刘庆昌,马代夫[8]（2006）在《甘薯近缘野生种研究利用现状及展望》文中研究说明甘薯作为新型能源作物的作用已凸显出来。由于其自身的遗传特点和有效资源匮乏,限制了甘薯品种的遗传改良。大量的甘薯属野生种则为解决甘薯遗传基础狭窄,促进甘薯品种改良提供了可能。甘薯近缘野生种具有高淀粉含量、抗病虫和抗逆等优良性状。在细胞学水平、形态学水平和分子水平对甘薯及其近缘野生种的亲缘关系有了初步的研究。除种间杂交外,胚培养、原生质体融合体细胞杂交以及利用生长调节剂克服杂交不亲和性等方法用于甘薯近缘野生种的利用,并取得了比较明显的进展。
刘庆昌,翟红,王玉萍[9]（2005）在《甘薯细胞工程与分子育种研究进展》文中指出本文对中国农业大学近年在甘薯细胞工程与分子育种研究上的主要进展进行了概述,包括甘薯细胞悬浮培养系的建立,用植物生长调节物质处理克服甘薯品种间杂交不亲和性及低结实性,甘薯及其近缘野生种体细胞杂交及种间体细胞杂种植株的生产,甘薯细胞辐射诱变及突变体的获得,甘薯遗传转化及转基因植株生产,甘薯遗传多样性的分析,甘薯主栽品种 DNA 指纹图谱的构建,甘薯抗茎线虫病基因的分子标记,甘薯相关基因的克隆等内容。
李强,刘庆昌,马代夫[10]（2004）在《甘薯原生质体培养研究进展》文中认为甘薯是世界上重要的粮食、饲料和工业原料作物,由于遗传改良进展缓慢,生物技术逐渐成为研究的热点,并应用于常规育种中去。对甘薯原生质体培养植株再生、利用原生质进行体细胞杂交和作为遗传工程受体的研究进行了综述。
二、甘薯及其近缘野生种Ipomoea lacunosa愈伤组织植株再生（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、甘薯及其近缘野生种Ipomoea lacunosa愈伤组织植株再生（论文提纲范文）
（1）甘薯miR2111、miR156及其靶基因的鉴定和功能研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 缩略词 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 植物miRNA研究进展 |
| 1.1.1 植物miRNA生成和作用机制 |
| 1.1.2 植物miRNA功能 |
| 1.1.3 植物miR156 研究进展 |
| 1.1.4 植物miR2111 研究进展 |
| 1.2 植物花青素研究进展 |
| 1.2.1 结构基因在花青素合成中的作用 |
| 1.2.2 转录因子在花青素合成中的作用 |
| 1.2.3 环境因子在花青素合成中的作用 |
| 1.2.4 miRNA在花青素合成中的作用 |
| 1.3 植物CRISPR/Cas9 研究进展 |
| 1.3.1 CRISPR/Cas系统 |
| 1.3.2 CRISPR/Cas9 在植物中的应用 |
| 1.4 锌指蛋白ZFP研究进展 |
| 1.4.1 锌指蛋白结构 |
| 1.4.2 C2H2 型锌指蛋白分类 |
| 1.4.3 C2H2 型锌指蛋白功能 |
| 1.5 甘薯研究进展 |
| 1.5.1 甘薯相关组学研究进展 |
| 1.5.2 甘薯花青素相关基因研究进展 |
| 1.5.3 甘薯遗传转化研究进展 |
| 1.6 本研究的目的和意义 |
| 第二章 甘薯Ib-miR2111 及其靶基因IbZFP的功能研究 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 菌株和载体 |
| 2.1.3 试验试剂 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 甘薯Ib-miR2111 前体序列Ib-pri-MIR2111 的克隆 |
| 2.2.2 甘薯IbZFP基因的克隆及序列特征分析 |
| 2.2.3 Ib-miR2111 及其靶基因IbZFP的表达模式分析 |
| 2.2.4 Ib-miR2111 植物过表达载体的构建 |
| 2.2.5 IbZFP过表达载体的构建 |
| 2.2.6 Ib-miR2111 及其靶基因IbZFP的 CRISPR/Cas载体构建 |
| 2.2.7 Ib-miR2111 转基因拟南芥的获得 |
| 2.2.8 转基因拟南芥植株的鉴定和表达分析 |
| 2.2.9 拟南芥过表达株系花青素合成相关基因的分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 甘薯Ib-pri-MIR2111 的克隆 |
| 2.3.2 甘薯IbZFP的克隆及序列分析 |
| 2.3.3 IbZFP的同源进化分析 |
| 2.3.4 Ib-miR2111 及其靶基因IbZFP的表达模式 |
| 2.3.5 Ib-miR2111 过表达载体的构建 |
| 2.3.6 IbZFP过表达载体的构建 |
| 2.3.7 Ib-miR2111 及其靶基因IbZFP的 CRISPR/Cas9 载体的构建 |
| 2.3.8 Ib-miR2111 过表达转基因拟南芥植株的鉴定与表达分析 |
| 2.3.9 Ib-pri-MIR2111 CRISPR/Cas9 敲除转基因拟南芥植株的鉴定和分析 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 甘薯Ib-miR156 及其靶基因IbSPL2 的功能研究 |
| 3.1 材料 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 甘薯Ib-miR156 前体序列Ib-pri-MIR156 的克隆 |
| 3.2.2 甘薯IbSPL2 基因的克隆及序列特征分析 |
| 3.2.3 Ib-miR156及IbSPL2 的表达模式分析 |
| 3.2.4 Ib-miR156 植物过表达载体的构建 |
| 3.2.5 IbSPL2 过表达载体的构建 |
| 3.2.6 过表达Ib-miR156 转基因拟南芥的获得 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 甘薯Ib-miR156和IbSPL2 基因的克隆 |
| 3.3.2 IbSPL2 基因的序列特征 |
| 3.3.3 Ib-miR156和IbSPL2 表达分析 |
| 3.3.4 Ib-miR156 植物过表达载体的构建 |
| 3.3.5 IbSPL2 过表达载体的构建 |
| 3.3.6 过表达Ib-pri-MIR156 转基因拟南芥的获得与测定 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 三裂叶薯ItbSPL基因家族鉴定、表达及miR156 的调控分析 |
| 4.1 材料 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 ItbSPL家族成员的鉴定和特征分析 |
| 4.2.2 ItbSPL基因系统进化树的构建 |
| 4.2.3 ItbSPL基因的结构、保守基序分析及染色体定位 |
| 4.2.4 ItbSPL基因miR156 结合位点预测、鉴定 |
| 4.2.5 MiR156 及靶基因ItbSPL的表达分析 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 ItbSPL基因家族全基因组鉴定与特征分析 |
| 4.3.2 ItbSPL家族基因进化分析 |
| 4.3.3 ItbSPL家族基因的结构、保守基序分析及染色体分布 |
| 4.3.4 ItbSPL家族基因中miR156 作用位点分析和扩增 |
| 4.3.5 miR156 及其靶基因ItbSPL表达模式 |
| 4.4 讨论 |
| 第五章 甘薯悬浮细胞转化体系的建立 |
| 5.1 材料 |
| 5.2 方法 |
| 5.2.1 甘薯胚性悬浮细胞的培养 |
| 5.2.2 甘薯胚性悬浮细胞的转化 |
| 5.2.3 甘薯转基因株系的获得 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 茎尖胚性细胞团诱导 |
| 5.3.2 胚性细胞悬浮培养体系建立 |
| 5.3.3 胚性悬浮细胞的体细胞胚诱导 |
| 5.3.4 甘薯转基因愈伤生长情况 |
| 5.4 讨论 |
| 第六章 全文结论 |
| 参考文献 |
| Abstract |
| 附录 |
| 研究生期间发表论文 |
| 致谢 |
（2）甘薯杂交不亲和性研究进展（论文提纲范文）
| 1 甘薯种内杂交不亲和性研究 |
| 1.1 甘薯不孕群的划分 |
| 1.2 甘薯种内杂交不亲和性生理机制的研究 |
| 1.3 甘薯种内杂交不亲和性遗传机制研究 |
| 1.4 甘薯二倍体野生种种内杂交不亲和性分子遗传机制的研究 |
| 1.4.1 甘薯二倍体野生种种内杂交不亲和性遗传模式的研究 |
| 1.4.2 SRK/SLG同源基因在甘薯二倍体野生种中的克隆与分析 |
| 1.4.3 甘薯二倍体野生种S位点区域及种内不亲和性调控基因的筛选与鉴定 |
| 1.5 甘薯种内杂交不亲和性的克服 |
| 2 甘薯种间杂交不亲和性研究 |
| 2.1 甘薯近缘野生种在甘薯育种中的应用 |
| 2.2 甘薯种间杂交不亲和性生理机制的研究 |
| 2.3 甘薯种间杂交不亲和性的克服 |
| 3 展望 |
（3）甘薯及其近缘野生种三浅裂野牵牛（Ipmoea trifida）原生质体融合的初步研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 植物材料 |
| 1.2 叶柄原生质体分离和融合 |
| 1.3 融合原生质体培养和愈伤组织的形成 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 原生质体分离和融合 |
| 2.2 融合原生质体培养及愈伤组织形成 |
| 3 讨论与结论 |
（4）甘薯及其近缘野生种种间体细胞杂种的特性鉴定与遗传组成分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩写词表 |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 植物体细胞杂交研究进展 |
| 1.1.1 植物体细胞杂交的意义 |
| 1.1.2 植物体细胞杂交的方法 |
| 1.1.3 植物体细胞杂交的方式 |
| 1.1.4 植物体细胞杂种的筛选 |
| 1.1.5 体细胞杂种的鉴定 |
| 1.2 体细胞杂种的遗传和分子基础研究 |
| 1.2.1 体细胞杂种核基因组组成研究 |
| 1.2.2 体细胞杂种的基因组表观遗传研究 |
| 1.2.3 体细胞杂种细胞质基因组组成研究 |
| 1.3 植物抗逆研究进展 |
| 1.3.1 植物抗逆机制研究进展 |
| 1.3.2 体细胞杂种在抗逆育种上的应用 |
| 1.4 甘薯体细胞杂交研究进展 |
| 1.5 本研究的目的与意义 |
| 第二章 甘薯与I.triloba种间体细胞杂种XT1的特性鉴定和遗传组成分析 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 体细胞杂种XT1的形态学鉴定 |
| 2.1.3 体细胞杂种XT1的抗旱性鉴定 |
| 2.1.4 体细胞杂种XT1的产量与品质鉴定 |
| 2.1.5 体细胞杂种XT1的RAPD鉴定 |
| 2.1.6 体细胞杂种XT1的细胞学鉴定 |
| 2.1.7 体细胞杂种XT1的基因组SSR分析 |
| 2.1.8 体细胞杂种XT1的基因组AFLP分析 |
| 2.1.9 体细胞杂种XT1的基因组MSAP分析 |
| 2.1.10 体细胞杂种XT1的叶绿体基因组组成分析 |
| 2.1.11 体细胞杂种XT1的线粒体基因组组成分析 |
| 2.1.12 体细胞杂种XT1及其亲本植株的RNA-seq分析 |
| 2.1.13 体细胞杂种XT1及其亲本植株ABA信号途径、胁迫响应、光合作用和ROS清除相关基因的qRT-PCR分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 XT1的形态学观察 |
| 2.2.2 XT1的抗旱性鉴定 |
| 2.2.4 XT1的产量和品质鉴定 |
| 2.2.5 XT1的细胞学观察 |
| 2.2.6 XT1的RAPD分析 |
| 2.2.7 XT1的基因组SSR分析 |
| 2.2.8 XT1的基因组AFLP分析 |
| 2.2.9 XT1的基因组MSAP分析 |
| 2.2.10 XT1及其亲本基因表达水平的分析 |
| 2.2.11 XT1的叶绿体基因组组成 |
| 2.2.12 XT1的线粒体基因组组成 |
| 2.2.13 XT1及其亲本的转录组分析 |
| 2.2.14 XT1及其亲本植株干旱胁迫响应的模式分析 |
| 2.2.16 XT1的抗旱机制分析 |
| 2.2.17 XT1的块根膨大机制分析 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 体细胞杂交技术在遗传改良研究中的重要性 |
| 2.3.2 甘薯组种间体细胞杂种核基因组的遗传变异 |
| 2.3.3 甘薯组种间体细胞杂种核基因组的表观遗传变异 |
| 2.3.4 甘薯组种间体细胞杂种的细胞质遗传组成 |
| 2.3.5 体细胞杂交引起的遗传和表观遗传变异对杂种表型的影响 |
| 第三章 甘薯与I.triloba种间体细胞杂种KT1的特性鉴定和遗传组成分析 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 植物材料 |
| 3.1.2 体细胞杂种KT1的形态学鉴定 |
| 3.1.3 体细胞杂种KT1的抗旱性鉴定 |
| 3.1.4 DNA的提取 |
| 3.1.5 体细胞杂种KT1的基因组SSR分析 |
| 3.1.6 体细胞杂种KT1的基因组AFLP分析 |
| 3.1.7 体细胞杂种KT1的基因组MSAP分析 |
| 3.1.8 体细胞杂种KT1的叶绿体基因组组成分析 |
| 3.1.9 体细胞杂种KT1的线粒体基因组组成分析 |
| 3.1.10 体细胞杂种KT1及其亲本植株的RNA-seq分析 |
| 3.1.11 体细胞杂种KT1及其亲本植株响应干旱胁迫相关基因的qRT-PCR分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 KT1的形态学观察 |
| 3.2.2 KT1的抗旱性鉴定 |
| 3.2.3 KT1的基因组SSR分析 |
| 3.2.4 KT1的基因组AFLP分析 |
| 3.2.5 KT1的基因组MSAP分析 |
| 3.2.6 KT1及其亲本的基因表达水平分析 |
| 3.2.7 KT1的叶绿体基因组组成 |
| 3.2.8 KT1的线粒体基因组组成 |
| 3.2.9 KT1及其亲本的转录组分析 |
| 3.2.10 KT1及其亲本的干旱胁迫响应模式分析 |
| 3.2.11 KT1的抗早机制分析 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 甘薯与I.lacunosa种间体细胞杂种XL1的特性鉴定和遗传组成分析 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 植物材料 |
| 4.1.2 体细胞杂种XL1的形态学鉴定 |
| 4.1.3 体细胞杂种XL1的重金属胁迫抗性鉴定 |
| 4.1.4 DNA的提取 |
| 4.1.5 体细胞杂种XL1的基因组SSR分析 |
| 4.1.6 体细胞杂种XL1的基因组AFLP分析 |
| 4.1.7 体细胞杂种XL1的基因组MSAP分析 |
| 4.1.8 体细胞杂种XL1的叶绿体基因组组成分析 |
| 4.1.9 体细胞杂种XL1的线粒体基因组组成分析 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 XL1的形态学观察 |
| 4.2.2 XL1的重金属胁迫抗性鉴定 |
| 4.2.3 XL1的基因组SSR分析 |
| 4.2.4 XL1的基因组AFLP分析 |
| 4.2.5 XL1的基因组MSAP分析 |
| 4.2.6 XL1的叶绿体基因组组成 |
| 4.2.7 XL1的线粒体基因组组成 |
| 4.3 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（5）表达Cu/ZnSOD和APX的转基因甘薯植株的再生与耐盐性评价（论文提纲范文）
| 附件 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 甘薯遗传转化方法 |
| 1.2.1 根癌农杆菌介导法 |
| 1.2.2 发根农杆菌介导法 |
| 1.2.3 电击法 |
| 1.2.4 基因枪法 |
| 1.2.5 超声波法 |
| 1.3 根癌农杆菌介导的甘薯有益性状基因的应用 |
| 1.3.1 甘薯外源基因遗传转化研究进展 |
| 1.3.2 Cu/Zn SOD 和 APX 基因应用研究进展 |
| 1.4 甘薯遗传转化影响因素研究进展 |
| 1.4.1 遗传因素 |
| 1.4.2 环境因素 |
| 1.5 甘薯遗传转化存在的问题及展望 |
| 1.6 本研究的目的及意义 |
| 第二章 甘薯高效离体再生体系的建立 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 实验仪器、设备 |
| 2.1.3 实验所用培养基及试剂 |
| 2.1.4 胚性愈伤组织的诱导 |
| 2.1.5 甘薯胚性细胞悬浮培养系的建立 |
| 2.1.6 甘薯高效离体再生体系的建立 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 胚性愈伤组织的诱导及扩繁 |
| 2.2.2 胚性愈伤组织悬浮系建立 |
| 2.2.3 甘薯离体高效再生体系的建立 |
| 第三章 表达 Cu/ZnSOD 和 APX 的转基因甘薯植株的再生与鉴定 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 植物材料 |
| 3.1.2 实验仪器及设备 |
| 3.1.3 实验所用的培养基及试剂 |
| 3.1.4 根癌农杆菌菌株及质粒 |
| 3.1.5 根癌农杆菌介导的遗传转化 |
| 3.1.6 体细胞胚诱导及植株再生 |
| 3.1.7 拟转基因植株的 PCR 检测 |
| 3.1.8 探针制备 |
| 3.1.9 转基因植株的 Southern blot 分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 根癌农杆菌菌株 EHA105 对数生长期的测定 |
| 3.2.2 抑菌抗生素浓度的确定 |
| 3.2.3 选择压的确定 |
| 3.2.4 抗性愈伤组织的形成 |
| 3.2.5 体细胞胚的诱导 |
| 3.2.6 拟转基因植株的再生 |
| 3.2.7 拟转基因植株的 PCR 检测 |
| 3.2.8 转基因植株的形态特征观察 |
| 3.2.9 地高辛标记的探针 |
| 3.2.10 转基因植株的 Southern blot 分析 |
| 第四章 转基因甘薯植株耐盐性评价 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 植物材料 |
| 4.1.2 实验仪器、设备 |
| 4.1.3 实验所用试剂 |
| 4.1.4 盐胁迫处理 |
| 4.1.5 生理指标分析 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 徐薯 55-2 转基因植株盐胁迫下的反应 |
| 4.2.2 盐胁迫下转基因植株叶绿素含量分析 |
| 4.2.3 盐胁迫下转基因植株的细胞膜透性分析 |
| 4.2.4 盐胁迫下转基因植株的 MDA 含量分析 |
| 4.2.5 耐盐转基因甘薯材料的筛选 |
| 第五章 讨论与结论 |
| 5.1 讨论 |
| 5.1.1 ABA 在愈伤体胚化及再生中的作用 |
| 5.1.2 胚性愈伤组织状态对甘薯遗传转化的影响 |
| 5.1.3 抑菌抗生素对转化效率的影响 |
| 5.1.4 选择压强度对遗传转化的影响 |
| 5.2 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（6）甘薯种质创新技术及其创新材料（论文提纲范文）
| 1 有性杂交 |
| 2 体细胞杂交 |
| 3 转基因创新 |
| 4 诱变创新 |
| 5 展望 |
| 5.1 探索不亲和原因，优化子房、胚珠等培养体系，促进种间杂种创新 |
| 5.2 不断优化原生质体培养再生体系，拓宽体细胞杂种创制的范围 |
| 5.3 加大理化诱变在种质创新中的应用 |
（7）甘薯高频再生体系建立及离体诱变筛选耐盐突变体的初步研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 甘薯离体培养研究进展 |
| 1.1.1 组织及器官培养 |
| 1.1.2 细胞悬浮培养 |
| 1.1.3 体细胞胚胎发生 |
| 1.1.4 花药和子房培养 |
| 1.1.5 原生质体培养和体细胞杂交 |
| 1.2 植物离体培养筛选耐盐突变体的研究 |
| 1.2.1 耐盐植物的选育 |
| 1.2.2 耐盐突变体的鉴定 |
| 1.3 本研究的目的与意义 |
| 第二章 甘薯愈伤组织的诱导 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 甘薯外植体愈伤组织的诱导和生长 |
| 2.2.2 影响愈伤组织诱导的因素 |
| 2.2.3 愈伤组织不定根发生与影响因素 |
| 2.2.4 愈伤组织的最适生长培养基 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 甘薯愈伤组织器官发生 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 愈伤组织不定芽的分化 |
| 3.2.2 AgNO_3对愈伤组织分化的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 AgNO_3 在植物离体培养中的作用及机制 |
| 第四章 甘薯离体辐射诱变筛选耐盐突变体的研究 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 甘薯试管苗的耐盐性分析及选择压力的确定 |
| 4.2.2 甘薯辐射剂量的确定 |
| 4.2.3 耐盐突变体的筛选 |
| 4.2.4 耐盐突变体的生根与扩繁 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 辐射剂量的选择 |
| 第五章 耐盐突变体生理生化指标测定及其遗传稳定性的初步研究 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 材料 |
| 5.1.2 方法 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 甘薯耐盐突变体后代耐盐性检测 |
| 5.2.2 耐盐突变体的生理生化指标分析 |
| 5.2.3 耐盐突变体盆栽盐胁迫检测 |
| 5.2.4 盆栽苗的生理生化指标分析 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（10）甘薯原生质体培养研究进展（论文提纲范文）
| 1 甘薯原生质体培养研究进展 |
| 1.1 原生质体培养再生植株 |
| 1.2 体细胞杂交 |
| 1.3 作为遗传工程受体的应用 |
| 2 展望 |
四、甘薯及其近缘野生种Ipomoea lacunosa愈伤组织植株再生（论文参考文献）
- [1]甘薯miR2111、miR156及其靶基因的鉴定和功能研究[D]. 王婷. 山西农业大学, 2019(07)
- [2]甘薯杂交不亲和性研究进展[J]. 杨义伶,张雄坚,姚祝芳,罗忠霞,邹宏达,王章英,黄立飞,房伯平. 广东农业科学, 2018(08)
- [3]甘薯及其近缘野生种三浅裂野牵牛（Ipmoea trifida）原生质体融合的初步研究[J]. 李丽,李云. 江苏农业科学, 2016(12)
- [4]甘薯及其近缘野生种种间体细胞杂种的特性鉴定与遗传组成分析[D]. 贾礼聪. 中国农业大学, 2016(04)
- [5]表达Cu/ZnSOD和APX的转基因甘薯植株的再生与耐盐性评价[D]. 闫会. 中国农业科学院, 2013(02)
- [6]甘薯种质创新技术及其创新材料[J]. 周志林,唐君,张允刚,赵冬兰. 分子植物育种, 2009(04)
- [7]甘薯高频再生体系建立及离体诱变筛选耐盐突变体的初步研究[D]. 刘春月. 辽宁师范大学, 2009(07)
- [8]甘薯近缘野生种研究利用现状及展望[J]. 李强,刘庆昌,马代夫. 分子植物育种, 2006(S2)
- [9]甘薯细胞工程与分子育种研究进展[A]. 刘庆昌,翟红,王玉萍. 中国作物学会2005年学术年会论文集, 2005
- [10]甘薯原生质体培养研究进展[J]. 李强,刘庆昌,马代夫. 杂粮作物, 2004(05)